Unde să vă testați pentru HIV folosind metoda PCR. PCR pentru HIV, pentru ce este acest test?

Detectarea la timp a virusului imunodeficienței umane (HIV) este cheia pentru succesul terapiei antiretrovirale. Tratamentul adecvat vă permite să duceți o viață de calitate mai mult de 70 de ani prin controlul încărcăturii virale din organism.

Singura modalitate de a detecta virusul este efectuarea unor teste de laborator cu recoltarea de sânge venos de la pacient. Vă invităm să aflați cât timp după infecție un test de sânge va arăta HIV și ce să faceți dacă primiți un rezultat pozitiv?

Dacă există chiar și o mică șansă de infecție, ambii parteneri trebuie să fie testați pentru HIV. Dezvoltarea infecției este caracter individual, iar încărcătura virală va fi diferită între cei doi pacienți.

Dacă partenerul tău face un test HIV și obține un rezultat negativ, asta nu înseamnă că ești sănătos. Și, dimpotrivă, a da un diagnostic pozitiv partenerului tău nu înseamnă că ești infectat.

Prelevarea de sânge venos permite detectarea anticorpilor produși de organism ca răspuns la virus. Testarea este recomandată pentru ambii parteneri în același timp. Amintiți-vă, cu cât aflați mai devreme despre infecție, cu atât rezultatele care pot fi obținute cu terapie sunt mai mari.

Fazele și simptomele bolii

Cât durează să apară simptomele HIV? Primele semne sunt observate la 14-21 de zile de la infectare.

Denumirea fazei de dezvoltare a HIV	Simptome caracteristice	Ce trebuie să știi?
Incubarea	-tuse, – dureri de cap, - oboseală crescută, - temperatura corporala ridicata, - erupții cutanate, – stare generală de rău.	După 2-3 săptămâni, simptomele enumerate dispar și starea persoanei revine la normal.
Ascuns	Se caracterizează printr-o absență completă a simptomelor. O persoană poate să nu realizeze mult timp (5-10 ani) că virusul se înmulțește în corpul său.	Este imposibil să se determine infecția după simptome. Singura modalitate de a-l detecta este prin trecerea unor teste medicale speciale care determină cantitatea de anticorpi.
Secundar	-cresterea temperaturii, - ganglioni limfatici mariti, – erupții cutanate pe piele și mucoase, - ficat mărit – tulburări gastro-intestinale, – dezvoltarea activă a bolilor infecțioase.	Simptomele apar pentru o vreme, după care dispar din nou și starea pacientului se îmbunătățește. Cu toate acestea, infecția continuă să se dezvolte în organism.
Terminal	Se caracterizează printr-o slăbire completă a sistemului imunitar - nu este capabil să dea niciun răspuns imunitar.	În faza terminală a HIV, SIDA se dezvoltă.

Cât durează să apară SIDA? Simptomele bolii

După actul sexual neprotejat sau din momentul infectării prin alte mijloace, virusul se înmulțește în corpul uman, crescând încărcătura virală. Lipsa tratamentului (terapie antiretrovirală) duce la dezvoltarea SIDA după 10-12 ani.

Atenţie! Cu HAART adecvat și respectarea tuturor recomandărilor medicului, va fi posibilă controlul încărcăturii virale și încetinirea tranziției virusului la stadiul de SIDA.

Simptomele SIDA:

• boli infecțioase frecvente,
• piele palidă,
• căderea părului și a dinților,
• dureri articulare,
• fragilitatea țesutului osos (probabilitate mare de fracturi).

Tipuri de teste HIV

Puteți dona sânge pentru HIV la o clinică publică, un laborator privat sau la centre speciale SIDA. Tipul de analiză determină pregătirea pentru prelevarea de sânge, durata testului de laborator și probabilitatea de a obține un rezultat fals.

Imunoblotting

Immunoblotting (Western blot) este o metodă extrem de sensibilă pentru recunoașterea HIV, a cărei esență este separarea proteinelor virusului. Ele sunt transferate pe o membrană de nitroceluloză, iar apoi antigenele, care diferă în greutate moleculară, sunt comparate cu probele de pe banda de testare.

O caracteristică a imunoblotării este capacitatea de a determina stadiul infecției, ceea ce permite începerea imediată a tratamentului. Când să faceți un test HIV folosind această metodă? De obicei, este prescris atunci când se obține un rezultat pozitiv sau nedeterminat al RPGA și ELISA.

Analiză expresă

Un test rapid de sânge, urină și salivă poate detecta rapid prezența virusului. Rezultatul studiului fluidelor biologice devine cunoscut în 1-1,5 ore de la momentul livrării. Dezavantajul acestei metode este probabilitatea mare de a obține un rezultat nesigur dacă infecția a apărut recent.

Diagnosticare PCR

Diagnosticarea PCR detectează virusul la nivel de ADN și reprezintă cea mai precisă modalitate de a determina infecția. Probabilitatea de a obține un rezultat nesigur este de doar 1%.

Rezultatul diagnosticului PCR este cunoscut la 3 zile după recoltarea sângelui. Particularitatea tehnicii este că se bazează pe identificarea celulelor virusului în sine și nu pe căutarea anticorpilor produși.

Imunotestul enzimatic

Imunotestul enzimatic(ELISA) se bazează pe detectarea anticorpilor la HIV. Se recoltează sânge venos (strict pe stomacul gol!), care este verificat pentru prezența anticorpilor produși de organism.

ELISA este cea mai comună metodă de diagnosticare a HIV.

Cât durează până când testele HIV sunt gata?

Rezultatele majorității testelor HIV devin cunoscute în 3-10 zile de la momentul efectuării lor. Perioada este determinată de nivelul de material și echipament tehnic al laboratorului și de gradul sarcinii sale de lucru.

Înainte de a face analiza:

• NU mâncați mâncare cu 8 ore înainte de programare, donați sânge pe stomacul gol;
• NU bea alcool;
• NU bea apă gazoasă, sucuri și alte băuturi, cu excepția apă curatăși ceai neîndulcit;
• NU luați antibiotice și alte medicamente.

În ce cazuri este necesar să se facă un test HIV?

Testarea regulată pentru a detecta infecția este recomandată homosexualilor, lucrătorilor medicali și copiilor dacă s-au născut dintr-o mamă seropozitivă.

Este necesară testarea virusului imunodeficienței umane:

• după contact sexual neprotejat cu un partener neverificat,
• după viol
• cu ganglioni limfatici măriți și pierdere bruscă în greutate,
• cu boli virale frecvente,
• după transfuzie de sânge, transplant de țesut moi sau organ intern,
• când un partener este diagnosticat cu HIV.

Ce să faci dacă HIV este încă detectat?

Dacă este detectat HIV, contactați imediat un specialist de la Centrul pentru Prevenirea și Controlul SIDA. Acesta va emite o trimitere pentru un examen medical pentru identificarea bolilor concomitente și a posibilelor complicații.

Pe baza rezultatelor testelor și examinării, se elaborează un regim de terapie antiretrovială. Constă în consumul zilnic (de 2-3 ori pe zi) de medicamente care suprimă replicarea virusului.

Dacă a existat riscul de a contracta HIV, când vă puteți testa?

Primele semne de infecție la 70-75% dintre pacienți sunt observate la 14 zile după infecție ( durere în gât, febră, oboseală). Din păcate, majoritatea persoanelor infectate le atribuie unei răceli.

Un test de sânge pentru utilizarea metodei PCR se face după 2 săptămâni de la momentul suspectării infecției. Când se efectuează teste ELISA standard, virusul poate fi detectat numai după 3-5 luni.

În această perioadă, virusul se dezvoltă și se înmulțește în organism, ceea ce duce la creșterea încărcăturii virale și permite depistarea infecției. Este important ca fiecare persoană să aibă o perioadă individuală de incubație.

Dacă rezultatul este negativ, atunci nu mai este nevoie să vă faceți griji?

Dacă rezultatele testelor dau un diagnostic negativ, dar au trecut mai mult de șase luni de la infecția suspectată, probabilitatea de infecție rămâne. Se recomandă redonarea sângelui venos la încă 3 luni după testul inițial.

Motivele unui rezultat fals negativ se pot datora unei rate scăzute de reproducere a virusului (încărcare virală crescută), anumitor boli sau nerespectării recomandărilor înainte de a dona sânge.

Nu trebuie să vă faceți griji dacă, după efectuarea unui alt test HIV, rezultatul negativ este confirmat.

Ce ar trebui să fac dacă rezultatul testului este negativ, dar mai am simptome?

Din păcate, identificarea HIV după simptome nu este permisă. Diagnosticul se stabilește numai pe baza rezultatelor testelor de laborator (imunoblotting, ELISA etc.). Dacă un diagnostic negativ este confirmat prin analiză secundară, atunci simptomele care apar sunt rezultatul altor boli.

Cât de fiabil este un rezultat pozitiv al testului?

Probabilitatea ca rezultatul unui test pozitiv să fie fals este redusă la 1% pentru analiză la diagnosticarea utilizând metoda PCR. Cu alte studii, riscul de a obține un rezultat fals pozitiv este mult mai mare, așa că se efectuează teste repetate la confirmarea diagnosticului!

Motive pentru un rezultat fals pozitiv:

• diabet zaharat,
• sarcina,
• boli oncologice,
• STD,
• hepatită.

Ce este un rezultat nedeterminat?

Un rezultat nedeterminat înseamnă prezența a cel puțin unui set de proteine ​​la virus în imunoblot. De obicei se instalează dacă infecția a apărut recent și pacientul are o încărcătură virală scăzută.

Dacă rezultatul este nedeterminat, se repetă testul după 3 și 6 luni. În toată această perioadă, pacientul se află sub supravegherea unui medic.

Decodificarea rezultatelor

Performanța sistemelor de testare diferă (în funcție de analiza aleasă), dar atunci când sunt detectate 3 seturi principale de proteine, se pune un diagnostic pozitiv.

Rezultatele donării de sânge venos:

Deci, HIV poate fi determinat în organism doar prin teste. Nu ezitați să donați sânge venos dacă există posibilitatea de infectare!

De ce sunt HIV și SIDA atât de înfricoșătoare, ce metode de diagnostic există. Informații aprofundate despre studiile PCR.

Conform statisticilor furnizate de Organizația Mondială a Sănătății împreună cu organizația ONU UNAIDS, în ultimii patruzeci de ani, peste 25 de milioane de pacienți au murit din cauza HIV și SIDA. Nu degeaba epidemiologii au numit HIV ciuma secolului al XX-lea, deoarece pagubele cauzate de această infecție umanității sunt colosale. Țările de pe continentul african au fost cele mai puternic infectate. Infecția lovește puternic economiile statelor deja instabile, iar oamenii sunt săraci.

Când apar simptome, diagnosticul prompt este extrem de important. infecția organismului cu infecția HIV, deoarece un curs de terapie în timp util poate salva sau cel puțin crește viața pacientului. În zilele noastre, progresul tehnologic a parcurs un drum lung: cele mai noi moduri diagnosticul virusului HIV și SIDA, tratamentul este disponibil oricărei persoane de pe planetă, fiabilitatea testelor este caracterizată printr-un grad mic de eroare, iar terapia se caracterizează printr-un procent ridicat de eficacitate.

Diagnosticul infecției cu HIV

În țara noastră, identificarea prezenței infecției HIV în corpul unui pacient este complex de analize:

• Imunotestul enzimatic
• Blotting imun
• Reacția polimerazei în lanț
• Teste exprese

Imunotestul enzimatic.

Screening (test ELISA) este etapa inițială de determinare a infecției în organism. Se bazează pe compuși proteici ai virusului formați în condiții artificiale, care identifică anticorpii produși de celulele imune ca reacție la infecție. Se întâmplă reacție chimicăîntre reactivi, în urma cărora elementul indicator își schimbă culoarea. Aceasta înseamnă că rezultatul testului este pozitiv. Informațiile care utilizează această metodă pot fi obținute în câteva săptămâni de la momentul infecției. Această metodă nu detectează prezența infecției la pacient, ci determină anticorpii produși împotriva acestei infecții. Se întâmplă ca producția de anticorpi să înceapă la 10-15 zile după infectare, dar în marea majoritate a cazurilor mai târziu - după 1-1,5 luni.

Informațiile despre o astfel de analiză sunt procesate de la două până la zece zile.

Fiabilitatea diangozei pentru HIV este susținută de analiza IB. Exclusiv test pozitiv IB pentru virus poate servi drept motiv valid pentru afirmarea infecției.

Esența analizei:

Se prelevează o probă de sânge venos pentru analiză în laborator. Proba este pregătită suplimentar, compușii proteici care sunt prezenți în ea sunt electrificați în camera de testare, iar apoi sunt distribuiți în substanța gel în funcție de greutatea lor moleculară. O bandă de hârtie acoperită cu reactiv este plasată de mai multe ori în proba preparată. Dacă în probă există anticorpi împotriva virusului, are loc o reacție chimică și liniile devin vizibile pe banda de testare. Când apar 2 sau 3 liniuțe de p24, gp41 și gp120 sau gp160, rezultatul testului este pozitiv.

Dacă din analiza IB se obține un rezultat pozitiv, cu o eroare de unu la sută, se poate face o concluzie despre prezența infecției HIV în organism.

Teste rapide pentru HIV și SIDA

Cele mai recente tehnologii pentru determinarea virusului imunodeficienței în organism sunt metode exprese. Informațiile despre o astfel de analiză pot fi obținute în câteva minute de la finalizare. Cea mai mare fiabilitate se găsește în testele imunocromagrafice - benzi speciale de testare pe suprafața cărora este pulverizat un strat de reactiv. Anticorpii conținuți în materialul de testat vin în contact cu reactivul, schimbând culoarea indicatorului. După câteva minute, apar două dungi, care indică prezența infecției. Prezența unei singure linii înseamnă că nu există infecție.

Un astfel de test poate fi folosit ca unul suplimentar, informațiile despre un astfel de test sunt confirmate în mod necesar de alte studii.

Cât costă un test rapid HIV?

Un test expres pentru HIV va costa în medie 200-1000 de ruble.

HIV PCR este una dintre cele mai fiabile metode de a face acest diagnostic periculos pentru sănătatea și viața umană. Un medic poate recomanda testarea oricărei persoane care are motive să suspecteze infecția cu virusul imunodeficienței umane. Pacienții se întreabă adesea care este esența tehnicii și care sunt avantajele și dezavantajele acesteia.

Când și în ce interval de timp ar trebui să vizitați spitalul pentru a trimite biomaterial pentru cercetare?

PCR este o abordare de diagnostic care a apărut în medicina clinică datorită biologiei moleculare. Din această ramură a științei a ajuns cercetarea în medicină. Și a devenit activ folosit pentru a face diverse diagnostice, inclusiv infecția cu HIV.

Toată lumea știe că orice organism viu este format din ADN și ARN. Reacția în lanț a polimerazei se bazează pe capacitatea acestor acizi nucleici de a se autoreplica.

Este important să ne amintim că PCR este capabilă să detecteze chiar și concentrații mici de particule virale în sânge. Acest lucru se întâmplă din cauza faptului că în fluidul biologic circulă „fragmente” de acizi nucleici, care sunt captate și recunoscute de echipamente speciale. Acest lucru vă permite să faceți un diagnostic corect chiar dacă infecția a apărut foarte recent.

Și particulele virale nu au avut încă timp să se înmulțească în corpul pacientului. Materialul biologic obținut de la pacient este plasat într-un reactor special. Sângele venos este cel mai des folosit.

Componentele speciale, care interacționează cu particulele de virus, cresc foarte mult numărul de fragmente detectate. Ca urmare, fragmentele devin identificabile, pot fi evaluate și se pot trage concluzii despre infecție.

Donează sânge dintr-o venă conform metodei standard.

Nu mâncați înainte de a vizita medicul, este mai bine să veniți dimineața. Dacă pacientul este supus unui curs de imunostimulare, acesta trebuie întrerupt cu două săptămâni înainte de test.

Avantaje și dezavantaje ale tehnicii

Ca orice altă metodă de diagnosticare a unei anumite boli, testarea PCR are o serie de avantaje și dezavantaje. Avantajele metodei includ:

• probabilitate scăzută de a întâlni un rezultat fals negativ sau fals pozitiv;
• capacitatea de a folosi nu numai sângele pentru cercetare, ci și alte fluide biologice, cum ar fi scurgerile vaginale, materialul seminal etc. (cu toate acestea, după cum notează medicii, precizia poate scădea);
• capacitatea de a utiliza material odată luat pentru a diagnostica mai multe boli simultan;
• viteza de obținere a rezultatelor (dacă analiza este urgentă, rezultatele sunt primite a doua zi);
• capacitatea de a diagnostica rapid o infecție și, în consecință, de a începe tratamentul bolii, îmbunătățind astfel prognosticul;
• fără restricții de vârstă (prelevarea de sânge dintr-o venă poate fi efectuată chiar și la un nou-născut).

Desigur, PCR are și dezavantaje. Acestea includ:

• prețul destul de ridicat al studiului, mai ales în comparație cu metodele de screening de bază utilizate în majoritatea spitalelor;
• nevoia de echipamente sofisticate, care sunt și costisitoare;
• există încă șansa de a întâlni rezultate false dacă tehnologia de analiză, procesul de prelevare a sângelui este întreruptă sau persoana suferă de o boală autoimună, tumorală sau infecțioasă cronică.

Desigur, testarea PCR ar trebui efectuată la recomandarea unui medic.

Medicul va putea evalua în fiecare caz specific cât de fiabile vor fi rezultatele. Dacă medicul consideră că acest lucru este necesar, va sfătui pacientului său o altă metodă de diagnostic în loc de PCR. Sau, după primirea rezultatelor, va completa planul de acțiune de diagnosticare cu un articol suplimentar.

Mulți pacienți sunt îngrijorați de întrebarea dacă toți oamenii sunt supuși testării PCR pentru HIV. De fapt, diagnosticul nu este necesar pentru toată lumea. Cu toate acestea, există grupuri de pacienți care ocazional trebuie să doneze sânge pentru analiză.

• Diagnosticul preliminar

• Test de imunoglobulină pozitiv

Imunoblotting care dă un rezultat pozitiv pentru virusul imunodeficienței umane este în mod necesar confirmat folosind reacția în lanț a polimerazei. Faceți același lucru dacă PCR a fost efectuat mai întâi. Completarea reciprocă a studiilor elimină aproape complet posibilitatea apariției erorilor.

• Controlul terapiei

Pacienții cu statut HIV confirmat donează destul de regulat sânge pentru testarea PCR. Acest lucru este necesar pentru a monitoriza progresul tratamentului și, dacă este necesar, pentru a ajusta terapia.

• Evaluarea siguranței sângelui

Orice sânge donat trebuie testat folosind reacția în lanț a polimerazei.

Aceasta elimină transmiterea infecției cu HIV prin transfuzie de sânge.

• Evaluarea statutului nou-născutului

Dacă un copil se naște dintr-o femeie seropozitivă, el trebuie să fie supus și PCR. Acest lucru este necesar pentru a determina statutul copilului și pentru a dezvolta tactici pentru gestionarea ulterioară a acestuia.

Fiabilitatea studiului

Mulți pacienți sunt îngrijorați de întrebarea cât de fiabilă este reacția în lanț a polimerazei dacă intenționează să diagnosticheze virusul imunodeficienței umane. În ciuda faptului că PCR este una dintre cele mai moderne metode, încă nu poți avea încredere nici măcar 100%.

Astăzi, PCR încă nu este folosită ca metodă de screening tocmai pentru că poate da rezultate fals pozitive.

Pentru a evita acest lucru, medicii recomandă pregătirea adecvată pentru colectarea biomaterialului, dar nici măcar pregătirea nu ajută întotdeauna. De exemplu, testul poate da un rezultat pozitiv dacă o persoană are o tumoare malignă în organism. Dacă suferă de orice infecție cronică sau, de exemplu, un proces autoimun. Chiar și în ciuda posibilității de a obține un rezultat fals pozitiv, PCR este folosită în practică ca una dintre cele mai fiabile metode.

Pentru a elimina erorile, medicii recomandă adesea ca pacienții lor să facă din nou testul dacă rezultatul este pozitiv. De asemenea, în unele cazuri, se recomandă efectuarea suplimentară a unei reacții ELISA și a altor studii. Efectuarea unui set de teste dă întotdeauna un rezultat mai fiabil decât efectuarea unui singur studiu.

La ce poate fi folosit testul?

Nu toți pacienții știu exact pentru ce este utilizată reacția în lanț a polimerazei în practica clinică a unui medic.

• Este necesar să se detecteze boala în perioada latentă

Virusul imunodeficienței poate exista latent în organism pentru o lungă perioadă de timp.

PCR este singurul test care poate indica prezența unui agent patogen în organism. Chiar dacă există încă foarte puține particule virale.

• Stabilirea genotipului

Astăzi, au fost identificate mai multe genotipuri ale infecției cu HIV. Este adesea important să se determine ce genotip specific a infectat o persoană, deoarece selecția medicamentelor antivirale depinde de aceasta.

• Determinarea virusului și nu a anticorpilor împotriva acestuia

Unul dintre avantajele analizei este că tehnica poate detecta nu anticorpi la particulele virale, ci virusul în sine.

Mulți pacienți sunt interesați de motivul pentru care acesta este un avantaj. Ideea este că, dacă se pune accent pe detectarea agentului patogen în sine, probabilitatea de a întâlni reacții fals pozitive din cauza asemănării diferiților anticorpi este redusă. După cum notează medicii, în multe privințe, capacitatea de a detecta virusul în sine, și nu anticorpii, a făcut tehnica atât de eficientă.

Când se datorează?

Pacienții sunt adesea interesați de întrebarea cât timp durează vizitarea unui medic pentru a dona material biologic.

Totul depinde de ce anume intenționați să determinați folosind tehnica.

Se recomandă căutarea ADN-ului virusului imunodeficienței umane dacă se suspectează infecția și este necesar un diagnostic precoce. În medie, ADN-ul din sânge începe să fie detectat la zece zile după ce apare infecția. Cu toate acestea, se recomandă confirmarea analizei folosind ELISA, mai întâi după 4 săptămâni de la infecție și apoi după 12 săptămâni.

Dacă ELISA confirmă diagnosticul, starea pacientului este considerată pozitivă.

Cercetarea pentru determinarea ARN-ului este întotdeauna cantitativă. Este recomandat să faceți acest lucru dacă statut pozitiv Pacientul a fost confirmat și s-a început tratamentul cu terapie antivirală. Dacă există mult ARN în organism, atunci faza acută a bolii este diagnosticată. Dacă nu este suficient, se consideră că suprimarea agentului patogen a avut succes, iar terapia poate fi schimbată cu una mai blândă.

• Evaluarea rezistenței

Unele tulpini de HIV sunt rezistente la medicamentele folosite pentru a le trata. Se recomandă, de asemenea, un studiu pentru a evalua probabilitatea de non-răspuns la tratament. Se efectuează dacă nu există nicio ameliorare după prescrierea terapiei. Se recomanda si in perioada acuta a procesului infectios.

Virusul imunodeficienței umane se răspândește din ce în ce mai activ în populația umană în fiecare an. Orice persoană poate întâlni patologie și, prin urmare, uneori este vital să știți să puneți un diagnostic corect.

PCR este o metodă bună de diagnostic dacă este utilizată corect de către un medic. Și principalul lucru pentru pacient este să urmeze recomandările medicului pentru pregătirea pentru studiu, care nu sunt complicate.

Tehnica de diagnosticare PCR a fost dezvoltată inițial acum 35 de ani de omul de știință american Kari Mullis. Inventatorul studiului a primit Premiul Nobel internațional în 1993 pentru inovația sa. A devenit indispensabil pentru orice activitate de laborator.

PCR este folosită în biologia moleculară pentru a face multe copii (amplifica) secțiuni mici de ADN. ADN polimeraza poate adăuga doar o nucleotidă la o grupare 3-OH preexistentă. Deci are nevoie de un primer la care să poată adăuga prima nucleotidă. Această cerință vă permite să identificați o secțiune specifică a secvenței de model care trebuie diagnosticată. La sfârșitul reacției PCR, o anumită secvență se va acumula în miliarde de copii (ampliconi).

PCR implică un proces de încălzire și răcire numit ciclu termic, care este realizat de echipamente specializate. Reacția în lanț a polimerazei (PCR) este o tehnică relativ simplă. Îmbunătățește șablonul ADN pentru a produce fragmente specifice de ADN in vitro (analiza in vitro). Metodele tradiționale de clonare a unei secvențe de ADN într-un vector și replicarea acesteia într-o celulă vie necesită adesea câteva zile până la câteva săptămâni de cercetare. Dar puteți obține rezultatele amplificării secvenței ADN folosind PCR după câteva ore.

Majoritatea testelor biochimice utilizate în diagnosticul bolilor infecțioase necesită suficient cantitate mare material biologic. Pentru PCR această condiție nu este obligatorie. Astfel, PCR poate oferi o detecție mai sensibilă a patogenului. Și mai mult niveluri înalte amplificarea anumitor secvențe în mai puțin timp cu o cantitate destul de limitată de biomaterial. Aceste caracteristici fac tehnologia extrem de utilă. Nu numai în cercetare de bază, dar și în scop personal. Inclusiv testarea identității genetice, testarea criminalistică, controlul industrial al calității.

Valoarea principală a analizei constă în capacitatea de a identifica patologiile cu transmitere sexuală înainte de apariția primelor semne. Analiza PCR este utilizată atunci când este necesar un diagnostic precoce al infecției cu HIV. Precum și determinarea ARN-ului virusului în sângele donatorului. Datorită sensibilității ridicate a analizei, un răspuns poate fi obținut la 7-14 zile de la suspectarea infecției. Fiabilitatea diagnosticului va ajunge de la 85 la 98%. Cu toate acestea, testul PCR nu este prescris pentru toată lumea. Pentru că este un studiu destul de costisitor. Cel mai important, necesită echipament scump și anumite abilități profesionale din partea personalului de laborator. Dacă pacientul nu a fost anterior în situații asociate cu un risc crescut de infecție, nu este recomandabilă o reacție la polimerază.

Reacția calitativă a polimerazei pentru HIV

Efectuarea PCR de înaltă calitate pentru HIV vă permite să determinați prezența unei boli virale în organism. Pacientul poate primi rezultatul sub forma următoarelor note: pozitiv, fals pozitiv, negativ. Dar studiul nu face posibilă determinarea numărului de copii ale retrovirusului. Analiza calitativă nu se efectuează la pacienții care au fost diagnosticați anterior cu o infecție. Nu este prescris pentru a monitoriza eficacitatea terapiei antivirale.

PCR cantitativ pentru HIV

Se efectuează pentru a determina copii ale virusului ARN în materialul biologic al pacientului. PCR cantitativ este prescris numai pacienților cu o infecție identificată anterior, ca monitorizare a tratamentului în curs.

PCR în timp real

Folosit în diagnosticarea de laborator pentru a forma copii ale secțiunilor ADN. De asemenea, pentru simultan cercetare cantitativăși detectarea secvenței ADN în biomaterial. În esență, diagnosticul este PCR cantitativ.

Nota!

În diverse laboratoare puteți găsi mai multe formulări de diagnostic: „Determinare cantitativă PCR” și „PCR în timp real”.

Ambele analize sunt identice.

Preluarea materialului pentru diagnosticul HIV

Colectarea de material biologic pentru diagnosticul HIV prin PCR se realizează conform anumitor standarde. Manipularea se efectuează în camera de tratament. Se folosesc instrumente sterile de unică folosință. Pachetul cu instrumente se deschide direct în apropierea pacientului. Materialul colectat este plasat în tuburi sterile pre-tratate cu CrO3 (amestec de crom). Materialul biologic este sânge venos, care este donat dimineața și pe stomacul gol. Cu câteva zile înainte de test, ar trebui să evitați consumul de alcool, alimente grase și picante și să încetați să luați medicamente.

Daca anulezi medicamente nu este posibil și trebuie raportat înainte de analiză.

În plus, un frotiu din uretra și vagin poate fi luat pentru a identifica bolile cu transmitere sexuală concomitente. Studiul se desfășoară în mod anonim, iar pacientul primește personal rezultatele. Este recomandat să aveți la dvs. actul de identitate.

Cât timp după ce poți face un test PCR pentru HIV?

Este posibil să se detecteze prezența virusului HIV după 4-6 zile după infectare. ÎN în acest caz, Conținutul informațional al analizei va ajunge la 85%. După 10-13 zile, analiza poate determina boala cu o acuratețe de 98%. Un rezultat negativ va fi adevărat numai dacă este luat nu mai devreme de 2 săptămâni după infecția suspectată.

Motive pentru un rezultat fals pozitiv

Obținerea unui rezultat fals pozitiv este destul de dificilă.

Acest lucru este posibil dacă nu sunt respectate regulile de colectare a materialului biologic, tuburile sunt etichetate incorect, utilizarea unui sistem de testare de calitate scăzută și alți factori similari. În alte cazuri, șansa de a obține un rezultat similar nu este mai mare de 2%.

Cât durează pentru a obține rezultatele testelor?

Din punct de vedere tehnic, rezultatele PCR pot fi obținute în decurs de 4 ore. Cu toate acestea, în practică, pacientul primește un raport de laborator de la una la câteva zile. În general, timpul depinde de volumul de muncă al laboratorului și de cât de organizată este munca acestuia.

Efectuarea unei reacții de polimerază la un nou-născut

PCR este prescrisă atunci când un copil se naște dintr-o mamă seropozitivă. Efectuarea ELISA în acest caz nu este informativă. De când un copil păstrează anticorpi împotriva retrovirusului până la vârsta de aproximativ 2 ani. Din acest motiv, imunotestul enzimatic nu va oferi un răspuns precis. Când se efectuează PCR la un copil în vârstă de 4-6 săptămâni și se obține un rezultat pozitiv, vom vorbi despre infecție.

Dacă PCR efectuată între 8 săptămâni și șase luni prezintă rezultate negative (cu condiția ca copilul să nu fi fost hrănit laptele matern mama) infecția este exclusă.

De ce este PCR mai bună decât ELISA pentru detectarea HIV?

Reacția polimerazei face posibilă detectarea ARN-ului virusului și a prezenței acestuia în organism, inclusiv a celor cantitative. Sarcina ELISA este de a determina anticorpii împotriva infecției cu HIV. Testul imunosorbent legat de enzime nu este inferior PCR în determinarea posibilei infecții, precizia acesteia atinge 99%. Cu toate acestea, spre deosebire de PCR, nu este capabil să determine boala prin stadii incipiente dezvoltarea acestuia.

Avantajele HIV PCR

• Reacția polimerazei determină în mod direct prezența unui agent infecțios. De exemplu, ELISA poate detecta exclusiv anticorpi și produse reziduale ale unui microorganism.
• Testul identifică în mod clar un anumit agent patogen, chiar dacă există mai mulți agenți cu reacție încrucișată.
• Tehnica vă permite să examinați orice tip de material biologic, inclusiv picături uscate de sânge.

Unul dintre dezavantajele PCR este sensibilitatea crescută a analizei. Acest lucru provoacă uneori un rezultat fals pozitiv. Acest lucru se întâmplă dacă chiar și o cantitate mică de ADN străin este prezentă într-o eprubetă sau pe instrumente.

Diagnosticul HIV prin PCR și ELISA: interpretare, fiabilitatea rezultatelor

Un imunotest enzimatic, în care rezultatele testelor indică absența anticorpilor împotriva HIV și a antigenului p24 în organism, este negativ. Dacă aceste molecule sunt prezente, se emite o concluzie pozitivă de diagnostic. În unele cazuri, pacientul poate primi un rezultat fals pozitiv sau fals negativ. Aceasta este o consecință data devreme sarcina, prezența infecției herpetice, prelevarea incorectă a materialului, încălcarea transportului eprubetelor. În plus, rezultate similare se găsesc la pacienții cu boli autoimune în curs și diferite tipuri de hepatită. Se poate efectua Western Blot (blotting imun), care combină ELISA și separarea proteinelor virale.

Apoi, un rezultat pozitiv va fi în prezența infecției virale glicoproteina gp160. Este un precursor al glicoproteinelor gp41 și gp120 din învelișul HIV. Dacă aceste molecule lipsesc, rezultatul testului de laborator este considerat negativ. Efectuarea Western Blot în combinație cu ELISA vă permite să obțineți rezultate a căror fiabilitate depășește 98%. În cazul în care ELISA este pozitiv și Western Blot este negativ, testarea este considerată îndoielnică și necesită PCR.

Descriere

Metoda de determinare Determinare cantitativă, PCR cu detecție în timp real.

Material în studiu plasma sanguina (EDTA)

Vizita la domiciliu disponibila

Determinarea ARN HIV de tip 1 în plasma sanguină prin PCR cu detectare în timp real. Studiul este realizat cu echipamente de la Hoffmann-La Roche (Elveția) folosind tehnologie standardizată cu pregătire automată a probelor.

Un studiu al concentrației de ARN HIV de tip 1 în sânge, care este utilizat pentru a prezice și monitoriza eficacitatea terapiei.

Virusul imunodeficienței umane (HIV) este agentul etiologic al sindromului imunodeficienței dobândite (SIDA). Infecția cu HIV se poate transmite pe cale sexuală, prin sânge și produse din sânge contaminate sau de la o mamă infectată la făt. Între 3 și 6 săptămâni de la infecție, se dezvoltă de obicei un sindrom acut de scurtă durată, caracterizat prin simptome asemănătoare gripei și niveluri ridicate de viremie în sângele periferic. În cele mai multe cazuri, se dezvoltă un răspuns imun specific HIV și o scădere a viremiei plasmatice, de obicei în 4 până la 6 săptămâni de la debutul simptomelor. După seroconversie (apariția anticorpilor specifici), începe o fază asimptomatică stabilă clinic, care poate dura ani de zile. Perioada asimptomatică se caracterizează printr-un nivel scăzut al viremiei persistente în plasmă și o scădere treptată a nivelului de limfocite T CD4+, ceea ce duce ulterior la dezvoltarea imunodeficienței severe, multiple. infectii oportuniste, oncogeneza si moartea. La persoanele cu infecție HIV-1 stabilită, măsurarea cantitativă a nivelului de ARN HIV-1 din sânge este utilizată în scopul prognosticului și monitorizării terapiei antiretrovirale.

Indicatori analitici:

Specificitatea clinică a testului: 100%, cu un interval de încredere de 99,6-100%.

Sensibilitatea testului: de la 20 copii/ml.

Interval de testare liniar: 20 – 1 * 10 7 copii/ml

Sunt analizate subtipurile grupelor M și O (HIV-1).

Indicatii de utilizare

Testul este destinat utilizării în managementul pacienților infectați cu HIV-1, împreună cu datele clinice și alți markeri de laborator ai progresiei bolii. Testul este utilizat pentru prognostic (pe baza nivelurilor inițiale de ARN HIV-1) sau pentru a monitoriza eficacitatea terapiei antiretrovirale (pe baza modificărilor nivelurilor plasmatice de ARN HIV-1 pe parcursul terapiei antiretrovirale).

Atenție: testul nu este destinat screening-ului pentru HIV-1 în sânge și produse din sânge sau pentru diagnosticul de confirmare a infecției cu HIV-1.

Interpretarea rezultatelor

Interpretarea rezultatelor cercetării conține informații pentru medicul curant și nu reprezintă un diagnostic. Informațiile din această secțiune nu trebuie utilizate pentru auto-diagnosticare sau auto-tratament. Medicul face un diagnostic precis folosind rezultatele acest sondaj, precum și informațiile necesare din alte surse: istoric medical, rezultate ale altor examinări etc.

Unități de măsură: cantitatea de ARN detectată a virusului imunodeficienței umane tip 1, exprimată în C/ml (copii/ml). O copie a ARN-ului HIV-1 corespunde la 1,67 unități internaționale (UI) conform primului standard internațional OMS pentru ARN-ul HIV-1 în testele de detectare a acidului nucleic (NIBSC 97/656).

Interpretarea rezultatului:

• „nedetectat”: ARN HIV-1 nu a fost detectat sau　valoare sub limita de sensibilitate a metodei (20 copii/ml). Rezultatul este interpretat ca „ARN HIV-1 nedetectat”;
• < 20 C/ml (копий/мл): HIV-1 РНК выявлена в концентрации на пределе чувствительности метода, количественная характеристика в копиях/мл с удовлетворительной точностью невозможна;
• de la 20 la 10000000 C/ml (copii/ml): Valoarea obținută este în intervalul liniar, rezultatul este de încredere;
• >10000000 C/ml (copii/ml): Rezultatul este interpretat ca: „ARN HIV-1 a fost detectat la concentrația indicată dincolo de limita superioară a intervalului liniar; Testul a fost efectuat la o diluție de 1:X.”

Vă rugăm să rețineți că timpul de răspuns pentru testele PCR poate fi mărit atunci când sunt efectuate teste de confirmare.