Пуповинная кровь для ребенка. Сохранение пуповинной крови Кровь из пуповины

Я работаю в сфере трансплантации клеток костного мозга и меня часто спрашивают о целесообразности банкирования пуповинной крови. В ответ я предлагаю посчитать деньги и подумать, как потратить их с большей пользой.

Но сначала немного о клиническом применении пуповинной крови. Трансплантация стволовых клеток применяется с целью восстановления кроветворения после высокодозной химиотерапии при онкологических заболеваниях крови. Однако у пуповинной крови есть ряд недостатков значительно снижающих вероятность их применения.

Во-первых, трансплантация собственных стволовых клеток пуповинной крови может быть нецелесообразна при лейкозах, так как трансплантат уже может содержать клетки с мутациями спровоцировавшими данное заболевание.

Во-вторых, того количества стволовых клеток, которое содержит образец пуповинной крови, достаточно для трансплантации ребенку с массой тела не более 10 кг. Таким образом, если вы решили заплатить за хранение пуповинной, учтите, что после 3-х лет ребенку в случае заболевания этих клеток уже недостаточно.

Необходимо учитывать и тот факт, что частота онкологических заболеваний крови у детей составляет 8 на 100 000 детского населения. Учитывая низкие риски развития данного заболевания и малое количество стволовых клеток в пуповинной крови, востребованность образцов из коммерческих банков очень низкая.

Так, согласно отчету Европейского общества по трансплантации стволовых клеток , начиная с 2012 года количество трансплантаций стволовых клеток полученных из пуповинной крови снижается. Пуповинная кровь в качестве источника стволовых клеток для трансплантации уступила лидерство трансплантациям от взрослого донора.


Данный тренд обусловлен тем, что п олучить необходимое количество стволовых клеток у взрослого донора достаточно просто - об этой процедуре я рассказывал в своем .

Однако банки пуповинной крови продолжают наращивать объемы заготовки пуповинной крови на коммерческой основе. Стоимость услуг данных банков составляет 70 000 - 120 000 рублей за заготовку клеток и еще по 5 000 - 7 000 за каждый год хранения. Так вот, если уж вы хотите застраховать своего ребенка от тяжелого заболевания, то за эти же деньги в страховой компании вам предложат страховку от любого критического заболевания на долгие годы, а не на три первых года жизни. При этом страховка сможет покрыть все лечение, в то время как трансплантация клеток пуповинной крови - это только восстановление кроветворения после высокодозной химиотерапии, которая сама по себе стоит в несколько раз дороже самого трансплантата и применима лишь при нескольких редких заболеваниях крови.

На сегодняшний день о стволовых клетках слышали если и не все, то очень многие. Особый интерес тема вызывает у будущих родителей, которые находятся на пути принятия решения о сохранении крови с пуповины своего новорождённого малыша. От правильности их выбора может напрямую зависеть и здоровье ребёнка.

Поговорим о том, зачем пуповинная кровь хранится в специальных банках. Кроме этого, рассмотрим её характеристики и способы применения.

Что такое пуповинная кровь?

Такое название получила кровь, которая берётся из пуповины младенца и плаценты сразу же после родов. Её ценность состоит в большой концентрации стволовых клеток, которые обладают множеством положительных характеристик.

Что такое стволовые клетки

Клетки пуповинной крови получили название стволовых. Они являются главными "кирпичиками" при строении иммунной системы организма. Кроме этого, стволовые клетки имеют такую интересную особенность, как возможность деления на протяжении всего жизненного цикла. Это способствует восстановлению любых тканей организма. А еще стволовые клетки способны дифференцироваться абсолютно в любой другой которых существует более двухсот.

Как происходит сбор пуповинной крови

Итак, как должна собираться пуповинная кровь? Сразу стоит отметить, что эта процедура является совершенно безболезненной и для мамы, и для её новорождённого малыша. Кроме этого, она не несёт в себе никакой опасности.

Сразу же после родов в пуповинную вену вставляется игла, по которой кровь самотёком переходит в специальный пакет. В нём уже содержится жидкость, предотвращающая свёртываемость. Всего выходит от 50 до 250 мл крови, в составе которой содержится от 3 до 5 процентов стволовых клеток.

После отхождения последа акушер отрезает примерно 10-20 сантиметров пупочного канатика и помещает его в специальную упаковку.

Все биоматериалы должны быть доставлены в лабораторию на протяжении 4-6 часов. Там проходит их обработка, заморозка и размещение на хранение.

Срок хранения стволовых клеток и их использование

Сохранение пуповинной крови - процесс, который должен происходить с соблюдением всех необходимых правил и норм. Ведь именно от него зависит время "жизни" стволовых клеток.

При правильном хранении этот срок может составлять десятки лет, подтверждением чему является тот факт, что первый банк крови был открыт ещё в 1993 году. Именно с того момента и до нашего времени хранятся первые взятые стволовые клетки из пуповинной крови.

В том, что этот биоматериал на все 100 % в дальнейшем подойдёт непосредственно самому ребёнку, не может быть и сомнений. Кроме того, проведённые исследования показали, что использовать ценную жидкость могут также и (родители, братья и сёстры). При этом вероятность того, что кровь идеально подойдёт, находится в пределах 25 %.

Стволовые клетки у взрослого человека

После прочтения вышеописанной информации может возникнуть вопрос: почему стволовые клетки необходимо собирать именно у новорождённого ребёнка? Неужели их нет в организме взрослого человека? Конечно же есть. Но!

Главное отличие состоит в концентрации стволовых клеток в крови. С возрастом их количество постоянно уменьшается. В этом помогут убедиться результаты проведённых исследований: у новорождённых 1 стволовая клетка приходится на 10 тысяч клеток организма, в подростковом возрасте - на 100 тысяч, а после 50 лет - на 500 тысяч. При этом уменьшается не только их количество, но и качество. Пуповинные стволовые клетки намного активнее тех, которые добываются из костного мозга. Главной причиной тому является их молодость.

Зачем необходимо сохранять кровь из пуповины

Современная медицина продвинулась далеко вперёд и умеет многое. Но всё же существуют некоторые болезни, лекарство от которых до сих пор не было изобретено. Именно в таких случаях выходом из ситуации может стать использование пуповинной крови, а если быть точнее - стволовых клеток, которые содержатся в ней. К примеру, это могут быть заболевания иммунной системы. Сюда же можно отнести и случаи, когда необходимо восстановление или крови, а также биоматериал используют для скорейшей регенерации тканей после перенесённых обширных ожогов или ран.

Даже если малыш родился совершенно здоровым, это не даёт гарантии того, что стволовые клетки ему не понадобятся на протяжении жизни. К тому же они могут быть использованы и для лечения близких родственников. Поэтому стоит ещё перед родами задуматься о вопросе сбора пуповинной крови для обеспечения возможности в случае чего восстановить здоровье не только ребёнка, но и остальных

Лечение пуповинной кровью

Выше упоминалось о том, что пуповинная кровь и стволовые клетки, которые в ней содержатся, являются настоящей панацеей при избавлении от многих тяжёлых болезней. Но без конкретных примеров подобные слова останутся лишь пустыми звуками. Поэтому вспомним о некоторых наиболее распространённых заболеваниях (хотя всего их более 80), от которых можно избавиться благодаря использованию такого биоматериала. Для удобства все они будут разделены на взаимосвязанные группы.

Болезни крови:

• лимфома;
• гемоглобинурия;
• рефрактерная и апластическая анемия;
• серповидно-клеточная анемия;
• вальденстрема;
• пароксизмальная ночная гемоглобинурия;
• острый и ;
• анемия Фанкони;
• макроглобулинемия;
• миелодисплазия.

Аутоиммунные заболевания:

• ревматоидный артрит;
• детский церебральный паралич;
• травма спинного мозга;
• инсульт;
• болезнь Альцгеймера;
• системная склеродермия;
• болезни нервной системы;
• болезнь Паркинсона.

Онкологические заболевания:

• нейробластома;
• рак (молочной железы, почки, яичников, яичек);
• саркома Юинга;
• рабдомиосаркома;
• опухоль головного мозга;
• тимома.

Другие врождённые и приобретённые заболевания:

• нарушения метаболизма;
• иммунодефицит;
• сахарный диабет;
• мышечная дистрофия;
• цирроз печени;
• СПИД;
• гистиоцитоз;
• амилоидоз.

Особые показания и противопоказания для сохранения крови из пуповины

Существуют такие ситуации, когда вопросу сохранения пуповинной крови необходимо уделить особое внимание. Это касается случаев, когда:

• члены семьи являются представителями разных национальностей;
• у кого-либо из семьи диагностировались болезни крови либо злокачественные заболевания;
• в семье много детей;
• в семье уже есть больные дети;
• беременность возникла после проведения ЭКО;
• есть подозрения, что в будущем может возникнуть надобность в применении стволовых клеток.

Но бывает и так, что сохранять стволовые клетки запрещено. Это происходит в случаях положительного результата на наличие таких заболеваний, как гепатит В и С, сифилис, ВИЧ-1 и ВИЧ-2, Т-клеточный лейкоз.

Насколько эффективно лечение с применением стволовых клеток?

Учёным уже давно известно о полезных функциях, которыми обладает пуповинная кровь. И на сегодняшний день проводятся активные исследования по вопросу использования стволовых клеток для лечения разных заболеваний. Стоит отметить, что проходят они довольно успешно, и уже в скором будущем благодаря пуповинной крови можно будет избавиться от множества заболеваний. Кроме того, в лабораторных условиях из стволовых клеток можно вырастить новый полноценный орган! Такое открытие продвинуло медицину далеко вперёд и поставило её, так сказать, на новую ступень эволюции.

стволовых клеток и чем он занимается?

После того как было принято решение о сохранении пуповинной крови, остаётся разобраться всего с одним вопросом: а где она будет храниться? Существуют ли специальные места для подобных целей? Ответ, конечно же, положительный.

Банк стволовых клеток пуповинной крови - это место, где такой ценный биологический материал будет храниться с соблюдением всех необходимых норм. При этом существует два регистра: именной и общественный.

В первом случае кровь с пуповины ребёнка принадлежит его родителям, и распоряжаться ею могут только они. Но в такой ситуации они должны будут самостоятельно оплатить все услуги, начиная со взятия и обработки и заканчивая хранением.

Стволовыми клетками общественного регистра может воспользоваться любой человек при возникновении такой необходимости.

Выбор банка стволовых клеток

При выборе банка хранения стволовых клеток необходимо ориентироваться на несколько важных моментов. Рассмотрим каждый из них подробнее.

1. Время существования банка. В этом плане всё логично, ведь чем больше времени работает организация, тем больше ей доверяют клиенты, в основном за счёт уверенности в её стабильности. К тому же сотрудники такого банка обычно обладают большим опытом работы с пуповинной кровью.
2. Наличие лицензии. Это является обязательным пунктом. Банк должен иметь разрешение на забор, перевозку и хранение стволовых клеток, которое было выдано комитетом по здравоохранению.
3. База учреждения. Лучше всего выбирать банк, который находится на базе научно-исследовательского института или медицинского учреждения. Это даст гарантию того, что у них будут соблюдены все условия для работы с биологическим материалом и его хранения.
4. Наличие необходимого оборудования. Банк должен быть оснащён двойной центрифугой, а также аппаратами Sepax и Macopress.
5. Наличие системы автоматического контроля криохранилищ. Это поможет контролировать температуру в помещении с образцами пуповинной крови, а также получать отчёты об их хранении для размещения в специальный архив.
6. Наличие курьерской службы. Это необходимо для того, чтобы сотрудники банка могли быстро приехать в родильное отделение, забрать пуповинную кровь и доставить её в лабораторию. От оперативности их работы напрямую зависит сохранение жизнеспособности стволовых клеток.
7. Проведение банком научных исследований в области клеточных технологий. Данный пункт является не менее важным, чем все остальные. Кроме этого, банк должен сотрудничать с медицинскими учреждениями и ведущими НИИ города.
8. Наличие круглосуточной охраны. Этот пункт не требует дополнительных объяснений.

Помимо всего прочего, можно дополнительно уточнить, есть ли у банка опыт применения стволовых клеток в целях лечения. Наличие положительного ответа будет только очередным плюсом.

Вот мы и ознакомились с вопросом "что такое пуповинная кровь". Применение её, как видим, показано для лечения тяжёлых заболеваний, когда медицинские препараты уже бессильны. Но в любом случае решение о том, собирать пуповинную кровь своего новорождённого ребёнка или нет, принимают только его родители.

Среди множества мероприятий, которые предлагают беременным, особняком стоит забор и хранение пуповинной крови. Суть процедуры в следующем: сразу после родов из пуповины получают кровь, которая принадлежала плоду. Выделенные из неё клетки замораживают и хранят в специальном банке до тех пор, пока они не потребуются.

Ценность пуповинной крови заключается в том, что она содержит биологически активные стволовые клетки, и поэтому хорошо подходит для нужд клеточной терапии и трансплантологии.

Банки пуповинной крови делятся на именные - в них хранят кровь тех детей, родители которых заключили соответствующий контракт, и банки-регистры, создаваемые на основе безвозмездного донорства. Любой человек, которому для лечения требуется пуповинная кровь, может обратиться в банк-регистр. Однако проблема заключается в том, что подобрать подходящую кровь бывает очень трудно: необходимо соответствие по основным антигенным системам, иначе чужеродные клетки вызовут у пациента реакцию отторжения. К сожалению, в России коллекция у банков-регистров достаточно скудна, поэтому приходится искать кровь часто за рубежом, на что требуются время (от 6 месяцев до года) и немалые деньги (от 15000 Евро). Возможный выход из сложившейся ситуации - запасать собственную кровь ещё при рождении: она будет всегда доступна и в случае необходимости идеально подойдёт для трансплантации.

Процедура сохранения пуповинной крови хорошо отработана и на контрактной основе доступна любым родителям - только мало кто о ней слышал. Мы решили узнать поподробнее о такой возможности и обратились за сведениями в ведущий именной банк пуповинной крови Банк стволовых клеток «КриоЦентр», созданный на базе Научного Центра Акушерства, Гинекологии и Перинатологии.

Чем ценна пуповинная кровь?

Пуповинная кровь богата кроветворными стволовыми клетками, т.е. клетками-родоначальниками элементов крови. Их используют для трансплантации, когда собственное кроветворение нарушается: при лейкозах, тяжелых нарушениях иммунной системы и других заболеваниях. Противники хранения пуповинной крови резонно замечают, что такие патологии, хоть и являются жизнеугрожающими, встречаются редко. Однако, с другой стороны, в перспективе предполагается, что стволовые клетки будут использоваться по более широким показаниям. В любом случае, уже сейчас успешно проведены тысячи трансплантаций пуповинной крови, спасшие жизнь больным с ранее считавшимися неизлечимыми заболеваниями.

Пуповинная кровь - не единственный источник кроветворных клеток, но у неё есть ряд преимуществ: лёгкое и безопасное получение, молодость, а потому высокая функциональная активность стволовых клеток и иммунологическая совместимость. Для того же, чтобы воспользоваться заранее заготовленной кровью, требуется от нескольких дней до нескольких недель.

Пуповинную кровь новорожденного можно использовать для лечения других членов семьи. Документированы успешные случаи пересадки родителям, бабушкам и дедушкам и даже двоюродным братьям и сестрам. Однако наибольшие шансы оказаться совместимыми имеют дети одних многодетных родителей.

Сохранять или не сохранять пуповинную кровь, каждые родители решают в зависимости от своего материального положения и от того, насколько нужной они считают эту процедуру. Следует учитывать, что забор пуповинной крови особенно показан для тех детей, в чьих семьях встречались тяжелые заболевания кроветворной системы или уже есть больные дети, которых можно вылечить пуповинной кровью брата или сестры, а также этническим меньшинствам, которым трудно найти совместимого донора в международных банках-регистрах.

Как проводится забор пуповинной крови?

После рождения ребёнка акушерка перевязывает и пересекает пуповину. Затем материнский конец пуповины обрабатывают стерильным раствором и с помощью иглы забирают из пупочной вены кровь в специальный стерильный контейнер с антикоагулянтом. Пуповинной крови обычно немного, около 80 мл, поэтому целесообразно дополнительно извлекать из плаценты всю имеющуюся в ней кровь.

Процедура абсолютно безболезненна и занимает несколько минут. Её можно провести как при нормальных родах, так и в ходе кесарева сечения. Более того, при многоплодной беременности технологически возможно собрать пуповинную кровь каждого из детей.

Как выделяют стволовые клетки?

Не позднее чем через сутки после забора образец попадает в банк. Прежде чем отправлять кровь на хранение, её нужно тщательно обработать. Вначале образец проверяют на инфекции, определяют группу крови и резус-фактор, затем «процессируют», то есть получают концентрат стволовых клеток. С помощью специального прибора удаляют избыток плазмы и практически все эритроциты. Полученный концентрат анализируют под микроскопом для определения жизнеспособности клеток. Следующий этап – заморозка клеток, которая не должна привести к их гибели. С этой целью добавляют криопротектор, предотвращающий образование «острых, рвущих клетки» кристаллов льда. Затем концентрат плавно замораживают до -90°С и помещают на карантинное хранение (пары жидкого азота, -150°С), где они находятся до того момента, пока не будут готовы результаты всех анализов. Наконец, приблизительно через 20 дней образцы переносят в постоянное хранилище (жидкий азот, -196°С).

На выходе получается от 5 до 7 пробирок концентрата. Помимо основных пробирок, заготавливают несколько пробирок-спутников - они содержат минимальный объём плазмы и клеток, достаточный для проведения анализа. Например, если владелец крови захочет использовать её для своего родственника и потребуется сделать проверку на совместимость, не надо будет размораживать основной образец - достаточно будет извлечь пробирку-спутник.

Как хранят стволовые клетки?

Клетки пуповинной крови хранятся в особых ёмкостях с жидким азотом в отдельной комнате, расположенной глубоко под землёй. Низкую температуру поддерживает специальная автоматизированная система, непрерывно контролирующая уровень жидкого азота. Она будет работать даже в случае отключения центрального электроснабжения. Банк пуповинной крови круглосуточно охраняется.

Исследования показывают, что в таком состоянии клетки остаются практически сохранными на протяжении многих лет. Уже сейчас не вызывает сомнения, что они не теряют своих свойств за 15-17 лет. Теоретически замороженные клетки могут храниться бесконечно долго.

Кому принадлежат стволовые клетки?

До совершеннолетия ребенка запас клеток пуповинной крови принадлежит его родителю или тому, кто указан в договоре хранения. После совершеннолетия сам ребёнок становится владельцем.

Сколько стоит договор?

За то, чтобы забрать, выделить и заморозить клетки пуповинной крови, придётся однократно заплатить около в 2000 Евро. В дальнейшем хранение образца обойдется в 3000 рублей в год (сумма прописывается в договоре и в последующем не меняется).

Что нужно сделать, если Вы хотите сохранить пуповинную кровь?

На любом сроке беременности нужно прийти в банк пуповинной крови, сдать анализы на инфекции и заключить договор. Затем сотрудники банка заранее доставят в роддом именной комплект с уникальным штрих-кодом, договорятся с врачом и акушеркой, обеспечат забор и доставку крови в банк, где из неё будут выделены стволовые клетки.

Не важно, предполагаются ли платные или бесплатные роды либо же кесарево сечение. Если женщина доставлена скорой помощью со схватками в ближайший роддом, следует позвонить по круглосуточному телефону и сообщить своё местонахождение - сотрудники банка договорятся с врачами.

Термины "стволовые клетки", "пуповинная кровь", "криобанк" наши соотечественники впервые услышали сравнительно недавно — пять лет назад. В то время как в США первый криобанк стволовых клеток пуповинной крови "Cryo-Cell" был открыт в 1992 г. Тем не менее первое предположение о существовании стволовых клеток было высказано именно русским ученым. В 1909 г. профессор Военной медико-хирургической академии Санкт-Петербурга А. А. Максимов сделал сенсационное заявление о том, что в организме человека есть так называемые "стволовые" клетки, способные при определенных условиях превращаться в зрелые, дифференцированные клетки организма. Несколько позже профессор московского НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Н. Ф. Гамалеи А. Я. Фриденштейн подтвердил предположение коллеги и, изучая возможности этих особых клеток, стал разрабатывать сферу их применения.

Сейчас, по словам профессора Б. В. Афанасьева, директора клиники трансплантации костного мозга Санкт-Петербургского Государственного медицинского университета им. И. П. Павлова, в России вопросами стволовых клеток занимаются ученые и практикующие врачи Москвы, Санкт-Петербурга и Новосибирска.

Зачем нужны стволовые клетки?

Единого термина для названия этих универсальных клеток пока не придумано. Их именуют и "стволовыми", и " клетками-предшественницами", и "запасными". В организме взрослого человека, особенно в костном мозге, существуют клетки, обладающие способностью превращаться практически во все виды клеток взрослых тканей, например в клетки мышц, печени и другие. В отличие от дифференцированных, стволовые клетки обладают свойством неограниченного воспроизводства, в то время как дифференцированные клетки выполняют только лишь определенные функции (мышечные клетки — сокращаются, эритроциты — переносят кислород и т.д.), и не способны делиться неограниченно. Превращение стволовых клеток в дифференцированные происходит под действием клеток и субстратов, окружающих стволовую клетку, попавшую в ту или иную ткань. Мы знаем, что в норме стволовых клеток в организме чрезвычайно мало, но они являются универсальными "запасными" частями, которые используются организмом для восстановления разных тканей. "Починка" организма с помощью стволовых клеток происходит следующим образом: когда в какой-то ткани возникает повреждение, то ее гибнущие клетки посылают в кровь сигнал тревоги, выделяя особые вещества. Этот сигнал поступает в костный мозг, который начинает активно выбрасывать в кровь определенные клетки-предшественники. Те, в свою очередь, с током крови поступают к пострадавшему участку. Здесь сотни пришедших на помощь стволовых клеток делятся на миллионы, копируя погибшие и таким образом, восстанавливая их баланс.

В настоящее время эти возможности стволовых клеток используются в практической медицине при лечении более 60 опасных заболеваний. Среди них основное место занимают заболевания системы крови, различные онкологические заболевания, наследственные и аутоиммунные болезни. С этим связано то, что метод пересадки гемопоэтических стволовых клеток, т. е. клеток-родоначальников системы кроветворения, становится рутинным методом лечения этой тяжелой группы болезней. Как ни печальна статистика, но у 1 ребенка из 600 в возрасте до 14 лет может наблюдаться развитие такого заболевания.

В то же время исследования последних лет показали, что, стволовые клетки могут быть с успехом использованы и при лечении, например, сердечно-сосудистых заболеваний. Так, при инфаркте миокарда (состоянии, при котором нарушается кровоснабжение участка сердечной мышцы) костный мозг больного начинает сразу выбрасывать в кровь стволовые клетки, но для эффективного восстановления ткани сердечной мышцы их количества обычно недостаточно. В настоящее время ведутся исследования по имплантации стволовых клеток в зону сердечной мышцы, поврежденную при инфаркте миокарда. Такие операции проведены, например, в Бельгии, Германии. При этом пациенту в область поврежденной сердечной мышцы успешно имплантировали стволовые клетки, полученные из его же костного мозга. Следует отметить, что в данном случае стволовые клетки стимулируют образование мышечной ткани — непосредственно миокарда, а также сосудов поврежденной области.

Способы получения стволовых клеток

В настоящее время стволовые клетки для трансплантации получают в клинических условиях:

1. Из костного мозга. Это оперативное вмешательство проводится путем множественных пункций костей таза, грудины. При этом заготавливают около 1000 мл костного мозга. Этот метод используется более 30 лет. Его недостатками являются необходимость наркоза и возможность развития послеоперационных осложнений, хотя встречаются они достаточно редко.
2. Из периферической крови. Аппараты — фракционаторы клеток крови — подсоединяются к венам больного или донора, и за одну две операции через них пропускают 10-20л крови. Эти процедуры проводятся на фоне введения человеку специальных лекарств (факторов роста), которые увеличивают содержание в крови стволовых клеток. Второй метод лишен недостатков первого, но более дорог, т.к. он требует использования дорогостоящей аппаратуры и факторов роста.
3. Из пуповинной крови. Стволовые клетки заготавливают в момент рождения ребенка, подвергают тщательному обследованию, замораживают и, в случаях их совместимости с каким-либо пациентом по антигенам главного комплекса совместимости — системе HLA, трансплантируют.

Количество стволовых клеток, которые распознаются по выявлению на их поверхности определенных антигенных структур, получаемых при заготовке материала для трансплантации из костного мозга, заготовленного от донора или больного, не превышает обычно 1*10 6 /кг, для концентрата стволовых гемопоэтических клеток из периферической крови — 1-10*10 6 /кг, для образца пуповинной крови — 1-4*10 6 /кг.

О третьем методе стоит рассказать более подробно. В пупочной вене новорожденного концентрация стволовых клеток относительно велика. Это связано с тем, что у новорожденных сохраняются элементы эмбрионального кроветворения, и сама плацента выделяет мощные стимуляторы этого процесса. Клетки крови, ответственные за иммунные реакции, у новорожденных менее зрелы, чем у взрослых, что ведет к снижению риска возникновения болезни "трансплантат против хозяина" и дает возможность успешно осуществлять трансплантации гемопоэтических клеток при наличии определенных различий в системе HLA реципиента и донора. Кроме того, сам процесс сбора такой крови осуществляется быстро и просто; он не требует какого-либо контакта с матерью и ребенком и, соответственно, безболезнен. Исследования последних лет доказали, что кровь, которая остается в пуповине, может быть собрана и заморожена для использования в будущем.

Трансплантация стволовых клеток. Теория и жизнь

В современной мировой медицине накоплен достаточный опыт реального излечения больных с помощью стволовых клеток. Примером тому может служить история шестилетней Кинси Моррисон, страдающей острой формой лейкемии 1 . Шанс на выздоровление, сама того не ведая, ей подарила новорожденная сестренка. Стволовые клетки малышки, взятые из пуповины после ее рождения, оказались абсолютно иммунологически совместимыми с клетками Кинси, в то время как никто из возможных 9 миллионов потенциальных доноров стволовых клеток в мире, данные о которых собраны в мировом Регистре доноров кроветворных клеток (включая ее мать), не подходил больной девочке.

Первая в Европе операция с использованием донорских стволовых клеток пуповинной крови от совместимого родственного донора была проведена в 1988 г. в Париже ребенку с анемией Фанкони 2 . Сегодня ребенок живет и здравствует. Этот пример стал одним из многих фактов успешного применения стволовых клеток пуповинной крови в лечении заболеваний крови. В целом стволовые клетки пуповинной крови были использованы более чем в 2 тысячах случаев трансплантаций.

В нашей стране заявлено существование регистра неродственных доноров на базе Гематологического центра, существуют также базы данных в Российском институте гематологии и трансфузиологии, Санкт-Петербургском медицинском университете — это банки данных на доноров, типированных по системе HLA и подписавших согласие на сдачу стволовых клеток в случае необходимости (из костного мозга или крови). За рубежом в 30 странах существует более 50 таких регистров, многие из которых имеют и банки образцов заготовленной и замороженной пуповинной крови. Если в национальные базы данных могут обращаться врачи и родственники больных, то в международные обращаются обычно через врачей (для этого существует определенный порядок, не всегда возможный для россиян).

Что такое криобанк?

Криобанки — это специально оборудованные хранилища стволовых клеток. В Европе и Америке банки стволовых клеток пуповинной крови начали появляться более 10 лет назад. Сегодня в общей сложности их 45. В этих банках хранятся образцы пуповинной крови, заготовленные от новорожденных-доноров, данные о которых включены в Национальные Регистры доноров гемопоэтических клеток. Заключив договор с таким банком, родители могут также сохранить "впрок" стволовые клетки и для своего ребенка. Клетки подвергаются тщательному обследованию, замораживаются по специальной программе и хранятся в жидком азоте при температуре — 196°С в состоянии полного анабиоза и могут быть использованы для лечения самого ребенка или его ближайших родственников. Иными словами, хранение собственных — аутологичных стволовых клеток — это биологическая страховка для ребенка в будущем, благодаря которой он имеет собственные здоровые "запасные" клетки на случай серьезной болезни. Ведь известно, что сегодня более 30% людей, нуждающихся в пересадке стволовых клеток, так и не находят подходящий трансплантат.

Технология забора пуповинной крови

Манипуляция осуществляется после рождения ребенка и пережатия пуповины: пуповина перерезается и кровь собирается в стерильный контейнер, содержащий антикоагулянт — раствор, предотвращающий свертывание крови. Обычно объем собранной крови колеблется от 60 до 120 мл. Эта процедура не представляет никакого риска ни для матери, ни для ребенка и может быть произведена как при обычном течении родов, так и при родах путем . Собранная пуповинная кровь упаковывается и помещается в специальный контейнер для перевозки, на который заранее нанесена вся необходимая информация.

Хранилище стволовых клеток разработано специально для их долгосрочного хранения. Оно представляет собой резервуар с жидким азотом объемом 500 л, оснащенный внутренней системой для размещения криобоксов с пробирками. Оно оборудовано сигнализацией и компьютерной системой, позволяющей круглосуточно следить за уровнем жидкого азота и за температурой в хранилище. К настоящему времени опыт хранения стволовых клеток насчитывает 15 лет, причем после размораживания клетки сохраняют все свои свойства. Размораживают образцы в водяной бане при температуре 40-41°С в течение 3-5 минут. Размороженные клетки должны быть сразу перелиты реципиенту.

Сроки "жизни" образцов пуповинной крови ограничены не столько длительностью хранения, сколько тем, что количества стволовых клеток, содержащихся в пуповинной крови, обычно бывает достаточно только для трансплантации детям до 10-14 лет. Поэтому сроки хранения пуповинной крови, взятой у конкретного новорожденного для возможной трансплантации ему же, ограничены указанными рамками. (Кстати, пуповинную кровь можно использовать не только для самих детей, но и для их родственников, которые совместимы с ними иммунологически и имеют показания для трансплантации и для которых количества этой крови будет достаточно).

Ученые, занимающиеся исследованием стволовых клеток, уверены, что в ближайшем будущем сфера их возможного использования значительно увеличится, т.к. научные исследования в этой области развиваются чрезвычайно динамично, и работа по созданию специальных банков пуповинной крови в России идет интенсивно. Услуги по хранению стволовых клеток пуповинной крови позволяют в какой-то степени обезопасить жизнь ребенка, и, возможно, других членов семьи. Как быстро они приживутся в нашей стране — покажет время, с единственной оговоркой, что сам шанс сохранения "клеток-лекарей" дается родителям только один раз — в момент рождения ребенка.

1 Лейкемия (лейкоз) — заболевание, известное большинству людей, под названием "рак крови".
2 Анемия Фанкони — наследственное заболевание, при котором поражаются стволовые клетки. Проявляется кровоточивостью, задержкой роста, гормональными нарушениями и склонностью к развитию лейкемии.

Любовь Фрегатова.
Д.м.н, профессор кафедры гематологии, трансфузиологии и трансплантологии Санкт-Петербургского ГМУ им. И.П.Павлова

Статья из октябрьского номера журнала.

Радикальным методом лечения многих тяжелых гематологических болезней является , которые выделяют из ткани костного мозга или крови. Осуществить его возможно путем поиска подходящего донора, что довольно не просто. Вероятность существования неродственного донора, совместимого по HLA-антигенному составу, составляет 1:100000. Для этого необходимы целые регистры типированных доноров, исчисляемые несколькими сотнями тысяч человек. Частично решить эту проблему помогает заготовка пуповинной крови.

Клиническое использование

В пуповинной крови содержится большое количество стволовых клеток, которые могут быть использованы в будущем для лечения ряда серьезных заболеваний.

Кровь, полученная из плаценты, является богатым источником гемопоэтических клеток. Концентрация колониеобразующих единиц в ней значительно превышает их количество в крови взрослого человека даже после стимуляции факторами роста. Она приближается по своему составу к костномозговой ткани. Поэтому стволовые клетки, содержащиеся в пуповинной крови, могут успешно применяться в гематологии для лечения следующих заболеваний:

• миелодиспластические синдромы;
• некоторые врожденные заболевания ( , наследственные гемоглобинопатии, синдром Барра и др.).

Трансплантация гемопоэтических клеток, полученных из плацентарной крови, является перспективным направлением в медицине, которое уже применяется в неврологии (последствия травм, дегенеративные заболевания нервной системы), ревматологии (диффузные ), онкологии и других отраслях.

Эффективность такого лечения определяется:

• своевременностью диагностики и лечения заболевания;
• степенью гистосовместимости (по системе HLA) донора и реципиента;
• возрастом больного (дает хорошие результаты у детей младше 5 лет);
• количеством пересаженных стволовых клеток (если их мало, то повышается риск рецидива патологического процесса или несостоятельности трансплантата).

Заготовка

Пуповинную кровь получают во время родов через естественные родовые пути или путем кесарева сечения. На этапе планирования процедуры беременную женщину всесторонне обследуют и исключают у нее заболевания инфекционной природы ( , и др.).

Готовясь к родам, в асептических условиях подготавливают систему для забора крови. Она состоит из специального контейнера с гемоконсервантом и устройством для взятия крови.

При нормальных родах через естественные родовые пути забор крови может осуществляться в двух вариантах:

• Если плацента находится в полости матки и еще не отделилась, то эксфузия крови выполняется после наложения зажима на пупочный канатик и отделения новорожденного от плодного места. Для этого пуповину тщательно обрабатывают растворами антисептиков, после чего производят пункцию пупочной вены, располагая емкость для сбора материала на 50-70 см ниже живота роженицы, чтобы кровь стекала в нее самопроизвольно.
• Если плацента уже выделена из полости матки, то ее располагают на специальной рамке плодной частью книзу, затем также обрабатывают и пунктируют вену пупочного канатика, после чего получают кровь в контейнер.

Из артерии пупочного канатика дополнительно берется 10 мл крови для первичного этапа обследования на принадлежность к группе крови и скрытые инфекции.

После окончания процедуры контейнер отсоединяют и транспортируют в банк пуповинной крови в специальном холодильнике или дополнительном контейнере, защищенном от перепада температур. При этом длительность хранения крови с гемоконсервантом до ее фракционирования не должна превышать 24 часов. Иначе стволовые клетки гибнут.

Хранение стволовых клеток

В емкости с жидким азотом стволовые клетки хранятся до 25 лет.

Выделение гемопоэтических клеток из пуповинной крови проводится в асептических условиях.

• Для этого кровь подвергается центрифугированию на высоких оборотах, в результате чего от нее отделяется плазма.
• После этого приступают к осаждению эритроцитов путем добавления седиментирующего вещества (желатин, гидроксиэтилкрахмал).
• Полученную клеточную взвесь смешивают с физиологическим раствором и дважды центрифугируют.
• Затем с помощью шприца отделяют клеточный осадок и подготавливают его к заморозке и длительному хранению.

Полученные из пуповинной крови стволовые клетки хранятся при низких температурах в замороженном состоянии:

• в холодильных камерах с температурой -80 градусов (до 6 месяцев);
• в парах жидкого азота при температуре -150 градусов (несколько лет);
• в емкостях с жидким азотом и температурой -196 градусов (более 20 лет).

Для замораживания клеточной взвеси ее предварительно охлаждают до +4 градусов на ледяной бане или в условиях холодильника. Затем шприцом набирают эту взвесь и переносят ее в мешок для консервирования, добавляя по каплям ограждающий раствор, после чего мешок запаивается и помещается в специальный аппарат для программного замораживания. При этом сам процесс осуществляется по четырехступенчатой программе, что позволяет сохранить жизнеспособность клеток в течение длительного времени.

Для использования замороженных образцов стволовых клеток непосредственно перед трансфузией производится медленное размораживание клеточной взвеси на водяной бане с температурой +40 градусов. После тщательного перемешивания выполняется исследование на сохранность клеток и их жизнеспособность.

Лабораторное тестирование

Применение в клинической практике крови, полученной из пуповины, требует специального тестирования в условиях лаборатории. Это позволяет определить принадлежность по HLA-системе, оценить качество препарата и выявить потенциальную возможность заражения инфекционными заболеваниями.

Перечень необходимых лабораторных анализов включает:

• определение объема пуповинной крови и содержания в нем клеточных элементов (стволовых клеток, лейкоцитов, эритроцитов);
• анализ крови на маркеры вирусных гепатитов;
• биохимическое исследование крови ();
• выявление антител к ВИЧ, бледной трепонеме, ;
• посев крови на стерильность;
• определение HLA-генотипа, группы крови по системе АВ0 и резус-фактору.

Для проведения всех исследований в полном объеме необходимо около 10 мл крови. Из них 4 мл сразу берут для тестирования, а остальные 6 мл центрифугируют и замораживают, после чего снова исследуют. Это дает возможность оценить качество трансплантата и прогнозировать время приживления кроветворных клеток в организме больного.

Пуповинную кровь для исследований используют очень экономно с целью минимизации потерь гемопоэтических клеток.

• Определение групповой принадлежности, HLA-фенотипа, биохимических показателей производится в порции крови, взятой из артерии пуповины.
• Бактериологическое исследование осуществляется в оставшейся после центрифугирования эритроцитарной массе.
• Серологические исследования сыворотки крови с целью выявления инфекций проводят с использованием плазмы, полученной в процессе фракционирования.
• Оценка концентрации клеток-предшественников гемопоэза производится в клеточном осадке, полученном путем разделения крови на фракции.

Преимущества и недостатки использования пуповинной крови

В настоящее время многие родители задумываются о том, стоит ли заготавливать пуповинную кровь ребенка, важно это или нет? Для того чтобы ответить на эти вопросы, рассмотрим преимущества этого метода лечения.

1. Процедура является абсолютно безопасной (не наносит вред здоровью матери и ребенка).
2. Не требует дополнительного обезболивания.
3. Имеет низкий риск заражения инфекционными заболеваниями.
4. Предоставляет возможность длительного хранения гемопоэтических клеток.
5. Обеспечивает биологическое страхование жизни ребенка при развитии у него тяжелых заболеваний (особенно кроветворной системы).

Однако существуют и недостатки применения пуповинной крови как источника стволовых клеток.

1. Основным из них является относительно небольшой объем получаемого материала и потери его при заготовке и лабораторном тестировании.
2. Еще одним недостатком этой процедуры является ее высокая стоимость при небольшой вероятности применения у ребенка. Однако она малосопоставима со стоимостью пересадки костного мозга, которая исчисляется десятками тысяч долларов.

В настоящее время в России и других странах существуют специальные банки пуповинной крови. Это могут быть частные и государственные структуры. Последние преследуют цели создать определенный запас биологического материала, который может использоваться для научных исследований и лечения больных.

Частные банки занимаются хранением именных образцов, которыми можно воспользоваться в случае болезни. Они предлагают своим клиентам различные тарифы:

• Средняя стоимость забора и хранения пуповинной крови в Гемабанке составляет 65000 рублей, отдельно оплачивается каждый год хранения (7000 рублей).
• В банке стволовых клеток «Криоцентр» пакет хранения стволовых клеток (25 лет) имеет общую стоимость около 230 000 рублей.